PCR試劑盒(教學(xué)用)
簡(jiǎn)要描述:貨 號(hào):D0049名 稱:PCR試劑盒(教學(xué)用)規(guī) 格:50T/500T價(jià) 格:240.00/920.00
產(chǎn)品型號(hào):
所屬分類:其他自產(chǎn)即用試劑
更新時(shí)間:2025-02-22
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
PCR試劑盒(教學(xué)用)
 
常規(guī)PCR發(fā)展到如今已經(jīng)是非常成熟,對(duì)于大多數(shù)的科研人員來說,買TAQ酶和dNTP就可以,而如果為省事,可以直接買PCR MasterMix。而本試劑盒從PCR的原理來讓學(xué)生學(xué)會(huì)PCR。本試劑盒帶有模板和引物,可以產(chǎn)生500bp的單一條帶。
試劑盒組成:
試劑盒組成  | 50次  | 500次  | 儲(chǔ)存條件  | 
Taq Polymerase(5U/ul)  | 50ul  | 500ul  | -20℃  | 
10×PCR Buffer  | 1ml  | 5ml  | -20℃  | 
MgCl2(25mM)  | 1ml  | 5ml  | -20℃  | 
模板(1ng/ul)  | 100ul  | 1ml  | -20℃  | 
上游引物(10mM)  | 100ul  | 1ml  | -20℃  | 
下游引物(10mM)  | 100ul  | 1ml  | -20℃  | 
ddH2O(PCR用)  | 2ml  | 25ml  | -20℃  | 
6×DNA Lodding Buffer  | 1ml  | 1ml  | -20℃  | 
500bp對(duì)照(50ng/ul)  | 100ul  | 1ml  | -20℃  | 
說明書  | 1份  | 1份  | RT  | 
保存說明:10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、ddH2O(PCR用)在2-8℃保存一個(gè)月對(duì)實(shí)驗(yàn)無影響,500bp對(duì)照、模板和引物在2-8℃保存一周對(duì)實(shí)驗(yàn)無影響。微量試劑打蓋前請(qǐng)離心。
自備試劑:瓊脂糖,電泳緩沖液,核酸染料(如EB,goldveiw等)
操作步驟:
按照下面的量加入試劑:可一次配50ul,或者一次配更多的量,如500ul,混勻再分成50ul一管。一般Taq Polymerasezui后加入。
加入試劑  | 加入量總50ul  | 加入量500ul  | 
ddH2O(PCR用)  | 37ul  | 370ul  | 
10×PCR Buffer  | 5ul  | 50ul  | 
MgCl2(25mM)  | 4ul  | 40ul  | 
模板(1ng/ul)  | 2ul  | 20ul  | 
上游引物(10mM)  | 2ul  | 20ul  | 
下游引物(10mM)  | 2ul  | 20ul  | 
Taq Polymerase(5U/ul)  | 1ul  | 10ul  | 
總體積  | 50ul  | 500ul  | 
混勻。
按照下面的條件設(shè)置反應(yīng)
溫度  | 時(shí)間  | 循環(huán)次數(shù)  | 
94℃預(yù)變性  | 3min  | 1 cycles  | 
94℃變性  | 30sec  | 30 cycles  | 
54℃退火  | 30sec  | |
72℃延伸  | 500-2000bp/1min  | |
72℃終延伸  | 5min  | 1 cycles  | 
反應(yīng)完降溫到25℃  | ||
反應(yīng)完后,取5ul產(chǎn)物,加入1ul 6×DNA Lodding Buffer 混勻電泳檢測(cè)??赏瑫r(shí)在兩測(cè)跑一個(gè)500bp的對(duì)照。(1.5%的膠可以得到理想的結(jié)果)
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